流式細胞抗體的儲存條件和穩定性維護直接影響其結合活性與實驗結果的準確性,需從儲存環境控制、分裝與解凍操作、日常使用防護等維度規范管理,以下是步驟化、可落地的維護指南:
基礎儲存條件把控
長期儲存:未開封的流式細胞抗體,優先置于 **-20℃或 - 80℃低溫冰箱 ** 凍存,其中熒光標記抗體建議存放于 - 80℃以減少熒光素降解;避免將抗體存放于冰箱門處(溫度波動大),應放置在冰箱內部穩定區域。
短期儲存:開封后且短期內(1-2 周)會使用的抗體,可在 2-8℃冷藏保存,無需反復凍融;注意避光保存,所有熒光標記抗體都需全程避光,防止熒光淬滅。
特殊抗體儲存:偶聯酶的流式抗體(如 HRP 偶聯抗體)需嚴格避免反復凍融,且冷藏時需密封防污染;生物素化抗體需與疊氮鈉分開儲存,防止疊氮鈉影響生物素活性。
科學分裝與解凍操作
分裝原則:收到抗體后,立即在無菌條件下將母液分裝為小體積(如 10μL、20μL)的工作液,每管為單次實驗用量,避免因反復凍融導致抗體蛋白變性、活性下降。
解凍要求:凍存的抗體需在室溫或 2-8℃條件下緩慢解凍,嚴禁直接溫水浴或高溫加速解凍;解凍后輕輕顛倒混勻,禁止劇烈渦旋,防止抗體聚集體形成。
日常使用與穩定性監測
使用前平衡:冷藏或解凍后的抗體,需在室溫下平衡 15-30 分鐘后再進行實驗,避免溫度差異影響抗體與抗原的結合效率。
污染防控:取用抗體時使用無菌吸頭,避免交叉污染;開封后的抗體需及時密封,若發現抗體溶液出現渾濁、沉淀、顏色變深,說明已失活,需立即丟棄。
活性驗證:建議每 3-6 個月對儲存的抗體進行一次活性驗證,通過已知陽性細胞樣本的染色實驗,對比熒光強度和陽性率,判斷抗體是否保持有效結合能力;若熒光信號顯著減弱,需更換新抗體。
額外穩定性維護注意事項
避免抗體接觸強氧化劑、去污劑等化學物質,儲存容器需選擇無酶、低吸附的離心管,減少抗體蛋白的非特異性吸附。
長途運輸時,需用干冰或冰袋維持低溫環境,確保運輸過程中溫度波動在允許范圍內,到貨后立即檢查抗體狀態并及時入庫存放。